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https://repositorio.ufms.br/handle/123456789/9710| Tipo: | Dissertação |
| Título: | Ocorrência, isolamento e caracterização de Azospirillum sp. em Jacaratia corumbensis O. Kuntze (Jaracatiá) |
| Autor(es): | de Oliveira, Romário Crisostomo |
| Primeiro orientador: | Paggi, Gecele Matos |
| Primeiro coorientador: | Brasil, Marivaine da Silva |
| Primeiro membro da banca: | Garcia, Nayara Fernanda Lisboa |
| Segundo membro da banca: | Corrêa, Bianca Obes |
| Terceiro membro da banca: | da Silva, Rosa Helena |
| Quarto membro da banca: | Cury, Juliano de Carvalho |
| Resumo: | A capacidade de fixação biológica do nitrogênio atmosférico por bactérias diazotróficas impulsiona os estudos de ocorrência, isolamento, caracterização e até mesmo seleção de estirpes eficientes em promover o crescimento vegetal. Porém, no Brasil, poucos estudos têm destacado a interação entre bactérias e plantas nativas, principalmente frutíferas. Diante do exposto, o objetivo deste estudo foi registrar a ocorrência, isolar e caracterizar bactérias do gênero Azospirillum associadas à Jacaratia corumbensis O. Kuntze, bem como verificar a habilidade dos isolados bacterianos quanto a produção de substâncias promotoras de crescimento vegetal. Para isto, foram coletados amostras de folhas, raízes e solo rizosférico de três indivíduos da espécie vegetal de duas áreas: Assentamento Taquaral e Assentamento Jacadigo, localizadas à cerca de 15 km da cidade de Corumbá, Mato Grosso do Sul. A verificação da ocorrência e isolamento das bactérias das partes amostradas de cada planta foram realizados por meio da técnica do Número Mais Provável utilizando os meios de cultura semissólidos NFB e LGI (isentos de nitrogênio) semi-seletivos para os gêneros Azospirillum sp. e Nitroaspirillum sp. (anteriormente Azospirillum amazonense). A contagem foi realizada com base na presença de película (em forma de véu), seguindo a Tabela de McCrady para três repetições por diluição. Após o crescimento positivo os frascos das maiores diluições foram repicados sucessivamente para meios semissólidos e sólidos semi-específicos (NFb/LGI) para confirmar o caráter diazotrófico. A caracterização morfológica dos isolados foi feita em meio sólido Batata, no qual a morfologia das colônias foi avaliada visualmente. As características geradas para cada isolado bacteriano foram comparadas e as suas semelhanças estimadas pelo Índice de Jaccard obtidos pelo algoritmo UPGMA. Foram isoladas 147 bactérias, das quais 50 apresentaram perfil diazotrófico. Estas foram selecionadas para avaliação das características funcionais relacionadas a produção de substâncias promotoras de crescimento vegetal, como solubilização de fosfatos de alumínio e cálcio, atividades amilolítica, fosfatases ácida e alcalina, e produção de Ácido indolacético. Além disso a variabilidade genética destes isolados foi analisada pela técnica do Box A1R-PCR e os perfis dos amplicons gerados de cada isolado foram agrupados pelo método UPGMA. Os resultados mostraram que não houve diferença significativa no Número Mais Provável de bactérias diazotróficas entre as áreas de estudo. Os isolados apresentaram alta variabilidade fenotípica e genotípica, sendo observada a formação de sete grupos a 70% e 77% de similaridade. O meio de cultivo com maior representatividade foi o NFb, sugerindo que os isolados bacterianos obtidos nesse estudo pertencem ao gênero Azospirillum. Do total, 36% dos isolados produziu AIA, 16% solubilizou fosfato de cálcio, 24% apresentou atividade fosfatase ácida, 22% apresentou atividade fosfatase alcalina e 66% apresentou atividade amilolítica, sugerindo que estes isolados apresentam potencial para promoção de crescimento. Assim, é o primeiro estudo de bactérias diazotróficas do gênero Azospirillum associadas à J. corumbensis para o Estado de Mato Grosso do Sul. |
| Abstract: | The capacity for biological nitrogenfixation by diazotrophic bacteria rises the studies of occurrence, isolation, characterization and selection of new strains efficient in plant growth promotion. However, in Brazil, few studies have focus on the interactions between bacteria community and native plant species, specifically fruit plants. Therefore, the aim of this study was to record the occurrence, to isolate and to characterize Azospirillum bacteria from Jacaratia corumbensis O. Kuntze, as well as, to verify the ability of the bacteria strains regarding the production of substances related to plant growth promotion. For this, leaves, roots, and rhizospheric soil samples of the plant species were collected from two areas (three individuals each): Settlement Taquaral and Settlement Jacadigo, located around 15 km far from Corumbá city, Mato Grosso do Sul state. To verify and isolate bacteria from each sampled part of the plant, we performed the Most Probable Number (MPN) approach, using the semisolid culture mediums NFB and LGI (nitrogen-free), which are semi-selective for the genera Azospirillum sp. and Nitroaspirillum sp. (previously Azospirillum amazonense). The counting was conducted considering the presence of a pellicle, following McCrady table for three repetitions per dilution. After positive growth, the flakes of bigger dilutions were transferred to semisolid and solid media (NFb/LGI) in order to confirm the diazotrophic character. The morphological characterization of bacteria strains was performed by growing colonies in Potato solid medium, and analyzing them visually. Morphological characters of each bacteria strain were compared and their similarities were estimated by Jaccard index using the UPGMA software. We isolated 147 bacteria, from that, 50 presented a diazotrophic profile. Those 50 bacteria were then used to evaluate functional feature related to the production of certain substances involved in plant growth promotion, such as aluminum and calcium phosphate solubilization, amylolytic and acid and alkaline phosphatase activities, and indolacetic acid (IAA) production. Besides, the strains genetic variability was analyzed using the Box A1R-PCR technic; the profiles obtained from each strain were grouped using UPGMA method. The Most Probable Number (MPN) was not significantly different between the two studied areas. The bacteria strains presented high phenotypic and genotypic variation, forming seven groups with around 70% and 77% of similarity. Most bacteria strains were obtained from NFb medium, suggesting that they may belong to Azospirillum genus. From the 50 bacteria strains, 36% produced IAA, 16% solubilized calcium phosphate, 24% presented acid phosphatase activity, 22% presented alkaline phosphatase activity, and 66% presented amylolytic activity, suggesting that these strains presented potential for plant growth promotion. Thereby, this is the first study regarding Azospirillum diazotrophic bacteria associated with J. corumbensis in the Mato Grosso do Sul state. |
| Palavras-chave: | Box A1R-PCR diazotróficas FBN jaracatiá |
| CNPq: | Botânica |
| Idioma: | por |
| País: | Brasil |
| Editor: | Fundação Universidade Federal de Mato Grosso do Sul |
| Sigla da Instituição: | UFMS |
| Faculdade, Instituto ou Escola: | INBIO |
| metadata.dc.publisher.program: | Programa de Pós-Graduação em Biologia Vegetal |
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| Tipo de acesso: | Acesso Restrito |
| URI: | https://repositorio.ufms.br/handle/123456789/9710 |
| Data do documento: | 12-Jul-2019 |
| Aparece nas coleções: | Programa de Pós-graduação em Biologia Vegetal |
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