The effects of pentoxifylline into the kidneys of rats in a model of unilateral hindlimb ischemia/reperfusion injury

Abstract

PURPOSE: To study the role of pentoxifylline (PTX) on remote kidney injury caused by muscle ischemia of left hindlimb of rats. METHODS: After xylazine and ketamine anesthesia, the left hindlimb of rats (n=66) were submitted to 6 hours ischemia (clamping the left common iliac artery). Three groups were used: sham group (SG, n=6), early group (EG, n=30) with reperfusion after 4 hours and late group (LG, n=30) with reperfusion after 24 hours. The saline solution (EG1, n=10 and LG1, n=10) or PTX (40mg.Kg-1) was administered in the reperfusion beginning (EG2, n=10/LG2, n=10) or divided in two doses in the ischemia beginning and reperfusion beginning (EG3, n=10/LG3, n=10). The plasmatic creatinokinase, urea, creatinine, sodium and potassium values were measure and histological samples from left kidney were prepared and H&E stained for scored cellular necrosis and degeneration of kidney tubules and thickness glomerulus determination. The apoptosis index was determined by immunohistochemical expression of the caspase-3. The tests of Mann-Whitney and Kruskal-Wallis (p < 0.05) were applied. RESULTS: The urea (90.5 ± 30.96 mg.dL-1), creatinine (2.28 ± 0.54 mg.dL-1), potassium (16 ± 3.66 mmol.dL-1) and mesangium thickness (0.97 ± 0.42 µm) values were significantly higher in group LG3. There was no significantly difference of caspase 3 expression between EG2 (16.35 ± 1.65%) and LG3 (15.57 ± 2.54%), and both were significantly worse than SG (9.8 ± 1.98%). CONCLUSIONS: The PTX has some protecting effect on remote kidney injury due to hindlimb ischemia/reperfusion injury only in the early phase of reperfusion.

OBJETIVO: Estudar o papel da pentoxifilina (PTX) nas lesões à distância no rim causadas pela isquemia no membro posterior esquerdo de ratos. MÉTODOS: Sob anestesia com xilazina e quetamina, o membro posterior de ratos (n=66) foi submetido a 6 horas de isquemia pelo clampeamento da artéria ilíaca comum esquerda. Foram estudados três grupos: grupo simulado (SG, n=6), grupo precoce (EG, n=30) após quatro horas de reperfusão e grupo tardio (LG, n=30) após 24 de reperfusão. A solução salina (EG1, n=10 e LG1, n=10) ou a PTX (40mg.Kg-1) foram administradas no início da reperfusão(EG2, n=10/LG2, n=10) ou divididas em duas aplicações no início da isquemia e no início da reperfusão (EG3, n=10/LG3, n=10). Foram medidos os valores plasmáticos da creatinofosfoquinase, uréia, creatinina, sódio e potássio. Amostras do rim esquerdo foram preparadas e coradas em HE para realizar o escore de necrose de células tubulares renais ou presença de obstrução tubular renal na área do córtex renal e da presença do espessamento do mesângio glomerular. O índice de apoptose foi determinado pela expressão imunoistoquímica da caspase-3. Foram aplicados os testes de Mann-Whitney e Kruskal-Wallis (p < 0.05). RESULTADOS: a dosagem de uréia (90,5 ± 30,96 mg.dL-1), creatinina (2,28 ± 0,54 mg.dL-1), potássio (16 ± 3,66 mmol.dL-1) e a espessura do mesângio(0,97 ± 0,42 µm) foram significantemente maiores nos animais do grupo LG3. Não houve diferença significante na expressão da caspase-3 entre os grupos EG2 (16,35 ± 1,65%) e LG3 (15,57 ± 2,54%) e ambos foram significantemente piores que o grupo SG (9,8 ± 1,98%). CONCLUSÃO: A PTX oferece algum efeito protetor nas lesões à distância nos rins de animais submetidos à lesão de isquemia e reperfusão de membro posterior, no período de até quatro horas após a reperfusão.