Cultivo in vitro e aclimatização de Cyrtopodium paludicolum Hoehne

Abstract

A propagação in vitro de orquídeas é utilizada para conservação de espécies e produção de plantas comercialmente importantes, porém, há exigências específicas para atender às necessidades de cada vegetal. O objetivo do presente trabalho foi determinar um protocolo para obtenção de mudas de Cyrtopodium paludicolum pelo uso de técnicas de propagação in vitro. Foram testadas técnicas de germinação in vitro para sementes de cápsulas maduras e imaturas, associadas com concentrações de ácido giberélico. Os tratamentos com as concentrações de 0,0; 4,0, 8,0 e 16,0 mg L-1 de ácido giberélico (AG3) foram utilizados para germinação de sementes de cápsula imatura e 0,0; 2,5; 5,0 e 10,0 mg L-1 de AG3 para sementes de cápsulas maduras. Para as sementes de cápsula imatura a germinação (61,06%) só ocorreu com 16,0 mg L-1 AG3; já para as sementes maduras a germinação ocorreu em todos os tratamentos, porém AG3 não foi fator determinante para obtenção dos maiores percentuais aos 90 dias após a incubação das sementes; mostrando que, dependendo da maturidade fisiológica das sementes, efeitos estimulatórios e inibitórios podem ocorrer. Quanto ao crescimento e desenvolvimento vegetativo, foram testados tipos e concentrações de carboidratos no meio de cultura, sendo: sacarose, glicose, frutose e rafinose nas concentrações de 0, 10, 20 e 40 g L-1, adicionados em meio Knudson. Foram utilizados protocormos e após 90 dias verificou-se que para a altura da parte aérea, na concentração de 10 g L-1, a sacarose mostrou-se vantajosa, porém na concentração de 40,0 g L-1 não houve diferença entre as fontes de carboidratos. Para comprimento da maior raiz, número de folhas e matéria fresca, a glicose e sacarose demonstraram-se mais eficientes nas concentrações de 25,0 a 32,0 g L-1. Concluiu-se que os tipos de carboidratos influenciaram o crescimento in vitro de C. paludicolum, sendo recomendável sacarose ou glicose nas concentrações de 25 a 32 g L-1. Na micropropagação da espécie, foram testados os fitorreguladores ácido 1-naftaleno acético (ANA) e thidiazuron (TDZ) em diferentes concentrações: ANA (0,00; 0,25 e 0,50 mg L-1) e TDZ (0,00; 0,50 e 1,00 mg L-1), adicionados em meio Knudson. Os explantes foram ápices radiculares com aproximadamente 1,0 cm, oriundos de vitroplantas de C. paludicolum. Houve interação significativa entre os hormônios vegetais, obtendo-se bons resultados na concentração de 0,25 mg L-1 de ANA e 0,50 mg L-1 de TDZ. Para a aclimatização, foram testados diferentes substratos (argila, terra vegetal, argila + terra vegetal, argila + adubo orgânico) na presença ou não de lâmina de água constante, resultando em oito tratamentos. Após 90 dias verificou-se que a lâmina de água demonstrou-se favorável em todas as variáveis exceto para o substrato argila. O substrato com argila + adubo orgânico resultou em melhor desenvolvimento vegetal além de proporcionar a maior média de sobrevivência das mudas de C. paludicolum.

ABSTRACT - Propagation in vitro of orchids is used for conservation of species and to production of plants commercially important, however, there are specific requirements to meet the needs of each plant. The objective of this study was to determine a protocol for obtaining seedlings Cyrtopodium paludicolum using techniques of in vitro propagation. Germination in vitro to mature and immature seeds techniques associated with gibberellic acid concentration were tested. Treatments with concentrations 0.0, 4.0, 8.0 and 16.0 mg L- 1 of gibberellic acid (GA3) were used for immature seeds germination and 0.0, 2.5, 5.0 and 10.0 mg L-1 GA3 for mature seeds. To the immature seed germination only occurred (61.06%) with 16.0 mg L-1 GA3, whereas for mature seed germination occurred in all treatments, but GA3 was not a determining factor for obtaining the highest percentage at 90 days after incubation of seeds, showing that depending on the physiological maturity of seeds that stimulatory and inhibitory effects may occur. For growth and vegetative development, types and carbohydrate concentrations were tested added to Knudson medium at 0, 10, 20 and 40 g L-1 of sucrose, glucose, fructose, and raffinose. Protocorms were used as plant material and after 90 days it was found that for the shoot height, the concentration of 10 g L-1 sucrose proved to be advantageous, but at a concentration of 40.0 g L-1 there was no difference between carbohydrate sources. For the longest root length, number of leaves and fresh weight, glucose and sucrose proved to be more efficient han fructose and raffinose. So the type of carbohydrate affected the in vitro growth of C. paludicolum , glucose or sucrose is recommended at concentrations of 25 to 32 g L- 1. In the micropropagation experiment, the plant hormones tested were 1- naphthalene acetic acid (NAA) and thidiazuron (TDZ) at different concentrations NAA (0.00, 0.25 and 0.50 mg L -1) and TDZ (0.00 , 0.50 and 1.00 mg L- 1 ), added Knudson medium. Explants from root tips measuring approximately 1.0 cm, derived from in vitro plants of C. paludicolum. There was a significant interaction between hormones, were used as plant material in the concentration of 0.25 mg L- 1 NAA and 0.50 mg L- 1 TDZ . For acclimatization, different substrates were tested (clay, topsoil, topsoil + clay and clay + organic fertilizer) in the presence or absence of constant water slide, resulting in eight treatments. After 90 days it was noted that the water slide demonstrated favorable in all variables except for the clay substrate. The substrate with clay + organic fertilizer showed better plant development in addition to providing the highest mean seedling survival of C. paludicolum .