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Tipo: Artigo de Periódico
Título: Fine needle aspiration biopsy to reestablish cell culture in an animal model of uveal melanoma
Título(s) alternativo(s): Biópsia aspirativa com agulha fina para restabelecer cultura celular em modelo animal de melanoma uveal
Autor(es): Correa, Zelia Maria da Silva
Marshall, Jean-Claude
Souza Filho, João Pessoa
Odashiro, Alexandre Nakao
Burnier Junior, Miguel Noel
Abstract: PURPOSE: To access the reliability of fine-needle aspiration biopsy in harvesting a sufficient amount of viable melanoma cells to establish a cell culture and maintain a melanoma cell line from an animal model of uveal melanoma. METHODS: For this study, fifteen male New Zealand albino rabbits had their right eye surgically inoculated with uveal melanoma cell line 92.1. The animals were immunosupressed with cyclosporine A using a dose schedule previously published. The animals were followed for 12 weeks. Intraocular tumor growth was monitored weekly by indirect ophthalmoscopy. After the fourth week, one animal was sacrificed per week preceded by fine-needle aspiration biopsy using a sharp 25-gauge, 1-inch long needle. Two separate aspirates were made from different areas of the tumor. Each aspirate was flushed to a separate cell culture media and sent for cell culture. The cells were frozen after two weeks when there were at least 1 million cells, which is enough to maintain a cell line. Cells were defrosted for HMB-45 immuno-stains to confirm the melanoma origin. RESULTS: Cell growth was observed from the samples harvested from 11 out of the 15 animals inoculated with uveal melanoma. All cell cultures, after defrost, immunoassayed positive for HMB-45. CONCLUSION: Fine needle aspiration biopsy seems to be a reliable method to harvest cells from solid intraocular melanomas in an animal model, to establish cell culture and to maintain a melanoma cell line.
OBJETIVO: Acessar a confiança da colheita de amostra celular suficiente através da biópsia aspirativa com agulha fina para estabelescer uma cultura celular e manter uma linhagem de células de melanoma a partir de uma modelo animal de melanoma uveal. MÉTODOS: Para esse estudo, 15 coelhos albinos da Nova Zelândia foram inoculados cirurgicamente com a linhagem celular 92.1 de melanoma uveal. Os animais foram imunosuprimidos com ciclosporina A usando uma dose previamente publicada. Os animais foram acompanhados por 12 semanas. O crescimento de tumor intraocular foi monitorado semanalmente pela oftalmoscopia indireta. Após a quarta semana, um animal foi sacrificado por semana, precedido pela biópsia aspirativa com agulha fina usando uma agulha de gauge 25 e comprimento 2,5 cm. Dois aspirados separados foram realizados a partir de áreas diferentes do tumor. Cada aspirado foi descarregado em um meio de cultura individual e enviado para cultura celular. As células foram congeladas após 2 semanas de cultura ou quando haviam pelo menos 1 milhão de células, o que é suficiente para manter uma linhagem celular. As células foram descongeladas para realizar imunocitoquímica com HMB-45 e confirmar sua origem melanocítica maligna. RESULTADOS: Crescimento celular foi observado nas amostras colhidas em 11 dos 15 animais inoculados com melanoma uveal. Todas as culturas celulares, após serem descongeladas, apresentaram imunoexpressão positiva para o HMB-45. CONCLUSÃO: Biópsia aspirativa com agulha fina parece ser um método confiável para colher células de tumores oculares sólidos em um modelo animal visando estabelecer e manter essa linhagem celular de melanoma.
Palavras-chave: Melanoma
Biópsia por Agulha Fina
Linhagem Celular Tumoral
Crescimento Celular
Biopsy, Fine-Needle
Cell Line, Tumor
Cell Enlargement
Editor: Arquivos Brasileiros de Oftalmologia
Citação: CORREA, Zelia Maria da Silva et al . Fine needle aspiration biopsy to reestablish cell culture in an animal model of uveal melanoma. Arq. Bras. Oftalmol., São Paulo, v. 72, n. 4, Aug. 2009 . Available from <http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0004-27492009000400015&lng=en&nrm=iso>. access on 28 July 2011. doi: 10.1590/S0004-27492009000400015.
Tipo de Acesso: Acesso Aberto
Identificador DOI: 10.1590/S0004-27492009000400015
URI: https://repositorio.ufms.br/handle/123456789/193
Data do documento: 2009
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