Identificação “in situ” de células de langerhans, macrófagos e moléculas MHC de classe II em pacientes infectadas pelo papilomavírus humano, com lesões de alto e baixo grau, em Campo Grande, MS

Abstract

A infecção persistente por alguns tipos de HPV no trato genital feminino pode causar neoplasia intra-epitelial cervical (NIC) e carcinoma. Sabe-se que, pequenas quantidades de partículas virais são expostas ao sistema imunológico no inicio da infecção. Investigação "in situ" da resposta imune por Imunohistoquímica pode explicar eventos importantes para resolução da infecção viral. A pesquisa teve por objetivo detectar a presença de células e moléculas da resposta imune em amostras histológicas de colo uterino de pacientes infectadas com o HPV. Foram incluídas 58 amostras de biópsia de colo uterino, sendo, 34 positivas para HPV DNA de alto risco oncogênico e com diagnóstico de NIC I, II, III e 14 negativas para HPV DNA e com diagnóstico histopatológico negativo para lesão intra-epitelial e malignidade (NILM), sendo o restante positivas pelo teste de captura híbrida e com diagnóstico histopatológico NILM. A imunohistoquímica foi realizada com anticorpos monoclonais anti-S100, anti-CD68, anti-HLA-DR e sistema de detecção de LSAB+Sys HRP (Dako), as lâminas foram observadas em aumento de 100X e 400X. A análise por imunohistoquímica mostrou que quanto mais severa a lesão maior a presença de células Langerhans (p=0,001) e de moléculas do Complexo de Histocompatibilidade Principal de classe II (MHC II) (p=0,021). Com relação aos macrófagos, não se observou correlação estatística entre a presença destas células e os achados histopatológicos. A correlação entre os diferentes níveis de carga viral e a presença simultânea de células de Langerhans, macrófagos e MHC II foi significante (p=0,022). Houve escassa quantidade de células de Langerhans e macrófagos, bem como da expressão de MHC II, nas amostras NILM, mesmo no grupo que, apesar de não possuir alterações celulares, era positivo para DNA HPV. Os resultados mostraram que nas amostras positivas para o DNA de HPV, mas que não apresentam alterações histopatológicas (NILM) ou apenas eram portadoras de lesão de baixo grau, e nas amostras com baixa carga viral, não estavam ocorrendo os sinais adequados para o início da ativação da resposta imune.

ABSTRACT - Persistent infection of female genital tract by some HPV types takes to cervical intraepithelial neoplasia (CIN) and carcinoma. In begin of infection small amounts of viral particles are exposed to the immune system. Immunohistochemystry investigation about “in situ” immune response can explain important events to resolved viral infection. The research aimed to detect immune cells presence in uterine cervix histologycal samples from HPV infected patients. We inlcuded in this study 58 uterine cervix biopsy samples from 34 positive patients to oncogenic high risk HPVDNA and with CIN I, II, III diagnostic, and 14 negative samples to HPVDNA and with histopathological diagnostic of negative to intraepithelial lesion and malignancy (NILM), the remaining samples were positive by hybrid capture and with NILM diagnostic. The immunohistochemystry were made with monoclonal antibodies anti-S100, anti-CD68, anti-HLA-DR and detection system LSAB+Sys HRP (Dako). The sections were observed in 100X and 400X. Analysis by Immunohistochemistry showed that how severe the injury as greater Langerhans cells (p=0.001) and major histocompatibility complex class II molecules (MHC II) (p=0.021) presence. About macrophages, there wasn’t statistical correlation among cells presence and histopathologic findings. The correlation between the different levels of viral load and the simultaneous presence of Langerhans cells, macrophages and MHC II was significant (p=0.022). There was a small quantity of Langerhans cells and macrophages and expression of MHC II in NILM samples; even within the group despite having no cellular changes were positive for HPV DNA. The results showed that in the samples positive for HPV DNA, but have no histopathological changes (NILM) or only low-grade lesion, and samples with low viral load isn’t going the adequate stimulus to the beginning of activation immune response.