Container (CP) para refrigeração e preservação do semen equino

Abstract

O objetivo do presente trabalho foi verificar a eficiencia do container (CP) para refrigerar o semen eqüino a 2,0°C por até 48 horas. Experimento 1 - determinada a taxa de refrigeração do CP1, 24 ejaculados de seis garanhões foram fracionados e estocados por 24 horas no CP1 e no EquitainerTM (EQ) - controle. Avaliou-se motilidade, pré-refrigeração (M- 0) e pós-24 horas (M-24). Utilizou-se o teste de Wilcoxon para dados emparelhados (α=5%). As taxas médias de refrigeração após 30 e 60 minutos foram, respectivamente, de - 0,36ºC/min. e -0,35ºC/min. (n=5). A motilidade foi superior para EQ-M24 (p<0,05). Experimento 2 - no CP2 foram processados dez ejaculados de um garanhão, avaliando-se (fatorial 2x2) dois volumes (50/100 ml) e duas concentrações espermáticas (500/750 x106), durante 24 e 48 horas (M-48), substituindo-se o sistema de refrigeração no M-24. Foram estudados o tempo, volume e concentração, comparando-se os tratamentos, dois a dois, pelo teste de Wilcoxon para dados emparelhados (α=5%). A motilidade diferiu entre tratamentos (p<0,05) às 24 horas, sendo T1>T2 e T1>T3, não diferiu no M-48, contudo diferindo entre M- 24 e M-48. O número de espermatozóides com membrana plasmática íntegra não diferiu entre tratamentos nem entre M-0 e M-24, contudo, M-48 diferiu de M-0 nos tratamentos 1 e 4 sendo igual entre M-24 e M-48. Experimento 3 – Foram utilizados 13 ejaculados de um garanhão para avaliar por quanto tempo o CP2 era eficiente para manter uma motilidade mínima de 30%. Analisou-se a motilidade e número de espermatozóides com membrana plasmática integra, pré-refrigeração e às 24, 36, 42 e 48 horas pós-refrigeração. Utilizou-se a estatistica descritiva. No M-24 todas as amostras apresentaram motilidade >30%. Aproximadamente 70% (9/13) delas tiveram motilidade >30%, às 42 horas. Experimento 4 – Foram utilizados 10 ejaculados de dois garanhões, avaliando-se motilidade, número de espermatozóides com membrana plasmática integra e taxa de prenhez ao 1o ciclo de 26 éguas, inseminadas com semen preservado no CP2 por 24 horas. A taxa de prenhez ao 1º ciclo foi de 69,23% (18/26). Experimento 5 - Foram processados 12 ejaculados de dois garanhões, avaliando-se motilidade, número de células com membrana plasmática integra e taxa de prenhez ao 1o ciclo de 13 éguas, inseminadas com o semen preservado no CP2 por 48 horas. A taxa de prenhez ao 1º ciclo foi de 69,23% (9/13). CP1 e CP2 apresentaram satisfatórias taxas de refrigeração e preservação seminal e, após 24 e 48 horas no CP2 bons indices de fertilidade foram obtidos.

The aim of this paper is to verify the efficiency of the container (CP) to cool the equine semen at 2,0ºC for up to 48 hours. Experiment 1 - After determining the CP1 cooling rate, 24 ejaculates of six stallions were fractionated and stored for 24 hours in CP1 and in EquitainerTM (EQ) - control. The motility pre-cooling (M-O) and post-24 hours (M-24) was evaluated. The Wilcoxon test for two related samples was used (α=5%). The mean cooling rates after 30 and 60 minutes was, respectively, -0,36ºC/min. and -0,35ºC/min. (n=5). The motility was higher for EQ-M24 (p<0,05). Experiment 2 - In CP2, 10 ejaculates of a stallion were processed, evaluating (factorial 2x2) two volumes (50/100 ml) and two sperm concentrations (500/750 x106), for 24 and 48 hours (M-48), substituting the cooling system in M-24. Time, volume and concentration were studied, and the treatments were compared, two by two, by the Wilcoxon test for two-related samples (α=5%). Motility differed between treatments (p<0,05) at 24 hours, being T1>T2 and T1>T3; it did not differ at M-48, but differed between M-24 and M-48. The number of sperm membrane integrity did not differ either between treatments or between M-0 and M-24; however M-48 differed from M-0 in treatments 1 and 4, remaining equal between M-24 and M-48. Experiment 3 - 13 ejaculates of a stallion were used to evaluate for how long the CP2 was efficient to keep a minimal motility of 30%. Motility and sperm membrane integrity at pre-cooling and at post-cooling (24, 36, 42 and 48 hours) were analyzed. Descriptive statistics was used. At M-24 all samples presented motility >30%. Approximately 70% (9/13) of them had motility >30% at 42 hours. Experiment 4 - 10 ejaculates of two stallions were used, evaluating motility, sperm membrane integrity and pregnancy rates at the 1st cycle of 26 mares inseminated with preserved semen in CP2 for 24 hours. The pregnancy rate at 1st cycle was 69,23% (18/26). Experiment 5 – 12 ejaculates of two stallions were processed, evaluating motility, sperm membrane integrity and pregnancy rate at 1st cycle of 13 mares inseminated with the preserved semen in CP2 for 48 hours. Pregnancy rate at 1st cycle was 69,23% (9/13). CP1 and CP2 presented satisfactory cooling and seminal preservation rates and, after 24 and 48 hours in CP2, good fertility rates were obtained.